Espectofotometria

Farmácia-Bioquímica Curso superior
1) Explique os cuidados que devem ser tomados para cada item relacionado abaixo. a)Uso de células de materiais diferentes para faixas de comprimentos de ondas específicos. b)Uso da mesma celula para analisar branco e analito c)Seleção do comprimento de onda adequado d)Variáveis que alteram a absorbância e)Procedimento de limpeza de celulas d)O intervalo que a lei de Beer pode ser aplicada
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Flaviana perguntou há 5 anos

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Professora Janaina P.
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Respondeu há 5 anos
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a) cada material emite um comprimento de onda diferente e específico. Se configurar o espectrofotômetro para 260nm, e o objeto emite onda de 280, a leitura será feita de forma errada. É necessário conhecer a característica de cada material. B) a mesma célula é utilizada para o branco e o analito para "configurar" a leitura. É como dizer para o espectrofotômetro: "essa característica neste comprimento de onda se refere a célula. Qualquer coisa diferente disso se refere ao analito". É similar ao processo de "zerar a balança", isto é: você elimina a massa referente ao bequer e o que aparece é a massa da matéria prima. C) cada material tem um comprimento de onda específico, assim, se ele emite ondas a 260nm, ele não será identificado em leitura diferente disso. Por exemplo: o DNA é lido a 260nm. Se configurar o espectofotometro a 460nm, vai ser identificado o quanto tem de DNA em 1 microlitro? Não. O mesmo vale para princípio ativo. D) variáveis que alteram a leitura da absorbância: comprimento de onda errado, célula inadequada, aparelho inadequado, não conhecer característica do material, sujidade na célula, prisma com sujidade e/ou quebrado, material contaminado, não dar branco, utilizar célula errada para dar o branco, entre outros. E) células sujas interferem na leitura da absorbância porque a luz vai ser refratada de forma errada, ou seja, vai bater na célula suja emitir o comprimento de onda errado. O espectrofotômetro vai dar um valor referente ao material mais a sujeira.

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