Uma das primeiras proteínas a ser produzida com utilização de técnicas de biologia molecular foi a insulina. Para isso, os pesquisadores utilizaram células de fígado para obtenção de RNA. Se a informação genética está no DNA e é muito mais fácil obter DNA a partir de sangue periférico, por que os pesquisadores utilizaram RNA de células do fígado para iniciar o processo de obtenção da insulina recombinante?
O gene de insulina se encontra no DNA, isso leva às pessoas a pensarem que seria mais fácil obter a sequência de aminoácidos da insulina a partir do DNA. No entanto, quando se trata de eucariotos, os genes possuem sequências chamadas íntrons, que não participam da tradução da proteína. Portanto, se queremos a sequência de uma proteína eucariótica, é mais fácil obter o RNAm maduro (do qual foi retirado os íntrons), pois este já possui os códons que resultam na sequência de aminoácidos da proteína.
Mesmo o RNA sendo mais instável do que o DNA, é ele que vai possuir a sequência de nucleotídeos (sem íntrons) que me dá a sequência de aminoácidos da proteína resultante da expressão gênica.
mRNA é muito mais instável do que DNA nos eucariotos, entretanto no mRNA está as informações "enxutas" dos genes da insulina, ou seja sem as sequências de íntrons que não aparecem no resultado final da expressão gênica. Com isso, também é necessário purificar o mRNA de possíveis genes que possam causar doenças em humanos e para isso é preciso que o mRNA fique estável por vários dias para realização desse processo. Por conta disso, são utilizadas de células hepáticas, que são especializadas em síntese proteica e portanto as moléculas de mRNA produzidas por essas células são mais estáveis do que em outras células.
