O ciclo da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) envolve três etapas principais, cada uma delas realizada a diferentes temperaturas:
Desnaturação (Estágio 1): A primeira etapa ocorre a temperaturas elevadas (geralmente em torno de 95°C). Essa etapa é responsável pela separação das duas fitas do DNA, resultando em fitas simples.
Anelamento (Estágio 2): A temperatura é então reduzida (geralmente entre 50-65°C) para permitir que os iniciadores ou "primers" reconheçam e se liguem às sequências específicas nas fitas separadas de DNA. Este contato é importante para que a polimerase se ligue e comece a extensão.
Extensão (Estágio 3): A temperatura é aumentada novamente (geralmente em torno de 72°C), a temperatura ideal para a atividade da DNA polimerase, permitindo que ela sintetize uma nova fita de DNA complementar a partir dos primers.
Com isso, vamos analisar as afirmações disponíveis:
Falsa. O estágio 2 refere-se ao anelamento (reconhecimento pelos primers) e não à síntese.
O estágio 1 com altas temperaturas é relativo à desnaturação da dupla fita de DNA. O estágio 2 comporta o reconhecimento de sequências pelos iniciadores. O estágio 3 permite o anelamento dos iniciadores à sequência-alvo.
Falsa. Aqui, a descrição do estágio 3 está incorreta. O estágio 3 é a extensão, não apenas o anelamento.
O estágio 1 é relativo à síntese de DNA complementar pela DNA polimerase (que necessita de temperaturas acima de 90°C para ser ativada). O estágio 2 comporta o reconhecimento de sequências pelos iniciadores. O estágio 3 permite o anelamento dos iniciadores à sequência-alvo.
Falsa. Esta descrição confunde as etapas, especialmente no que diz respeito à função de cada um.
O estágio 1 garante a acessibilidade das sequências de DNA na forma de fita simples. A redução das temperaturas no estágio 2 permite o reconhecimento de sequências pelos iniciadores. O estágio 3 permite o anelamento dos iniciadores à sequência-alvo e a extensão da fita complementar.
Correta. Esta afirmação descreve corretamente as etapas e suas funções envolvidas no ciclo da PCR.
O estágio 1 garante a acessibilidade das sequências de DNA na forma de fita simples. O estágio 2 permite o reconhecimento das sequências-alvo pelos iniciadores e o seu anelamento. O estágio 3 fornece o aumento de temperatura.
Portanto, a opção correta é:
O estágio 1 garante a acessibilidade das sequências de DNA na forma de fita simples. A redução das temperaturas no estágio 2 permite o reconhecimento de sequências pelos iniciadores. O estágio 3 permite o anelamento dos iniciadores à sequência-alvo e a extensão da fita complementar.