Olá, alguém poderia me responder, por gentileza?
Em HPLC de modo reverso, possuo uma mistura de substâncias, tais como, dimetilenociclohexatriamina, 1- naftilamina, 2- naftilamina, éter butilmentilico e 1,2 - naftodiol. A ordem de retenção desses compostos séria:
1) éter butilmentilico (mais retido)
2) naftilaminas
3) dimetilenociclohexatriamina
4) 1,2 naftodiol (menos retido)
Essa ordem está correta? Explique. Em pH ácido (5) essa ordem mudaria? Justifique.
Que modificações na fase móvel é necessário para diminuir a retenção do composto mais apolar?
A ordem de retenção dos compostos em cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) de modo reverso é determinada pela afinidade relativa dos compostos pela fase estacionária (geralmente C18) e pela fase móvel (uma mistura de água e um solvente orgânico, como acetonitrila ou metanol). A polaridade e a interação dos grupos funcionais dos compostos com a fase estacionária e móvel são fatores-chave.
Aumentar a polaridade da fase móvel: Aumentar a proporção de água na fase móvel ou usar um tampão de pH mais alto tornará a fase móvel mais polar e reduzirá a retenção do éter butilmetílico.
Usar uma fase estacionária menos polar: Se possível, trocar para uma fase estacionária menos polar, como uma coluna C8 em vez de uma C18, também pode reduzir a retenção do éter butilmetílico.
Ajustar o pH: Como mencionado anteriormente, em pH ácido, as naftilaminas podem se tornar mais retidas, então ajustar o pH da fase móvel pode influenciar a ordem de retenção.
Sucesso, Isabela!
Não a fase reversa significa que os compostos menos polares ficarão retidos mais fortemente e os mais polares sairão primeiro, logo o diool seria o mais polar e o primeiro a sair.
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