O genoma do Vírus da Dengue é composto por uma molécula de RNA de orientação positiva e o genoma do Papilomavírus Humano é composto por uma molécula de DNA circular. Quais componentes enzimáticos devem ser utilizados para o diagnóstico de cada um desses vírus com o emprego da técnica de PCR? Justifique sua resposta.
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O genoma do Vírus da Dengue é composto por uma molécula de RNA de orientação positiva e o genoma do Papilomavírus Humano é composto por uma molécula de DNA circular. Quais componentes enzimáticos devem ser utilizados para o diagnóstico de cada um desses vírus com o emprego da técnica de PCR? Justifique sua resposta.
PCR (Reação em cadeia da polimerase) é uma técnica que amplifica (copia) sequenências específias do DNA. Nesta técnica as duas fitas do DNA são separadas através de elevada temperatura, em seguida uma DNA polimerase termo-resistente sintetiza as fitas complementares a partir de pontos indicados pelo anelamento de primers ou iniciadores, que são sequênciacias de nucleotídeos pequenas que pareiam com os pontos iniciais da sequência que se quer copiar, os primers indicam o ponto onde a DNA polimerase iniciará a replicação. Após construção das fitas complementares, o DNA é então submetido a alta temperatura novamente para separar as fitas e iniciar um novo ciclo. Após alguns ciclos haverá milhares de cópias de um "pedaço" (sequência) específico do DNA.
Para uma PCR a partir de uma molécula de DNA é necessário o componente enzimático DNA polimerase termo-resistente. Para uma PCR a partir de uma molécula de RNA é necessário também uma enzima chamada de transcriptase reversa, que produzirá o DNA complementar (DNAc) a partir da sequência de RNA. Após a ação da transcriptase revarsa, a molécula de DNA resultante é submetida a PCR.
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